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水平等均具有重要的理论和现实意义.番茄青枯病植物疫苗番茄青枯病植物疫苗免疫抗病机理作植物疫苗.不同接菌浓度1×108,1×107,1×106,1×105,1×104cfu/mL番茄青枯病生防效果的影响番茄青枯病生防效果的影响最佳浓度和最佳时间,为青枯病植物疫苗的.工程菌FJAT-1458当工程菌FJAT-1458浓度小于1×106cfu/mL时,番茄青枯病的,1×108cfu/mL时,番茄青枯病的.,同时接种工程菌FJAT-1458和菌株FJAT-91,,工程菌FJAT-14583d,6d再接种菌株FJAT-91,番茄青枯病的发病率较高,致病性青枯雷尔氏菌FJAT-91处理25d后发病率分别为85%,90%,100%.

2,判断筛选的生防菌株生防能力如何,最重要的是其能否在寄主植物根围及植株体内定殖.104,106,108cfu/mL)植物疫苗工程菌FJAT-14582-3和5-6叶期疫苗工程菌FJAT-1458cfu/mL,其在番茄植株体内的定殖时间只有12d,且只在植株根部定殖,在茎和叶均无定殖.当植物疫苗工程菌FJAT-1458接种浓度为106cfu/mL和108cfu/mL时,其在番茄植株体内的定殖时间可达18d.(3)当接种浓度为106cfu/mL时,接种的番茄植株苗龄越小,工程菌FJAT-1458在番茄植株及根系土壤的定殖量越大.

3,本研究以疫苗工程菌FJAT-1458作为外源微生物胁迫接种番茄植株,接种后于不同时间取样分析番茄植株株高,根系长度,根系干重及植株不同器官(根,茎,叶)的防御酶系SOD(superoxidedismutase),POD(peroxidase),PPO(polyphenoloxidase)活性动态变化.结果表明,疫苗FJAT-1458胁迫接种对番茄植株株高,根系长度,根系干重影响不显着(P>,0.05),但对番茄植株不同部位的抗氧化酶影响较明显.疫苗FJAT-1458胁迫接种能导致番茄植株不同器官的POD,PPO和SOD酶活性总和显着高于对照植株,并且在胁迫处理植株与对照植株之间,POD,PPO和SOD的活性变化动态也有所不同.这说明,疫苗FJAT-1458的接种可提高植株对病原物入侵的防御能力.

青枯病发生与植株根系土壤微生物群落结构关系密切,引入磷脂脂肪酸(PLFAs)生物标记分析疫苗工程菌FJAT-1458胁迫对不同作物辣椒,丝瓜,番茄,芹菜根系土壤微生物群落结构的影响,从生态学角度揭示免疫抗的机理,为青枯疫苗的研发提供理论依据.研究胁迫茄子,辣椒,丝瓜,番茄,芹菜根际土壤胁迫茄子,番茄,芹菜根系土壤微生物PLFAs组成16:0含量最大达到398.14%该标记指示假单胞菌辣椒,丝瓜根系土壤微生物PLFAs组成19:0含量最大达到294.43%该标记指示细菌番茄根系土壤a11:0,i18:1H,i12:03OH,i19:1I,i16:1G,i14:03OH,17:03OH,18:1ω6c等脂肪酸标记,10Me17:0和10Me18:0,这两个标记在茄子,辣椒,丝瓜,番茄,芹菜根际土壤平均含量增加胁迫茄子,辣椒,丝瓜,番茄,芹菜根际土壤PLFAs总量能够促进作物根系土壤细菌和真菌的生长,而抑制放线菌的生长胁迫茄子,辣椒,丝瓜,番茄,芹菜根际土壤丝瓜芹菜Simpson指数茄子辣椒Simpson指数番茄芹菜指数茄子,辣椒丝瓜指数Pielou指数值植株本番茄,辣椒,粉蕉韭菜根系提取液植物疫苗工程菌FJAT-1458不同根际提取液对植物疫苗工程菌FJAT-1458的.番茄,辣椒,粉蕉的根提取液对工程菌FJAT-1458有促进作用,而韭菜对工程菌FJAT-1458抑制.光谱扫描分析表明这可能和发酵液组分中蛋白质的含量较低有关番茄和韭菜处理液在250-300nm区段有一吸收肩峰.观察发现不同根系处理液处理下菌株的菌落形态和弱化指数菌均无出现显差异.

和致病力菌株来自植株,对环境安全,筛选无致病青枯雷尔氏菌作为植物疫苗防治青枯病是青枯病生物防治的重要内容,对作物具有较好的防效,具有一定的生防潜能.随着现代生物科技的发展以及各学科之间的相互借鉴和渗透,相信在不久的将来即可研制出能在田间对作为青枯病有长期控制的效果的植物疫苗.今后将在青枯病免疫抗病机理的研究及茄科作物青枯免疫接种剂的研究与应用做更深入的探索.

AbstractIII

中文文摘V

第一章引言-1-

1.1番茄青枯病及其生物防治研究-1-

1.1.1番茄青枯病病原菌的致病力分化-1-

1.1.2番茄青枯病的致病机理-2-

1.1.3番茄青枯病的生防途径-2-

1.2番茄青枯病生物防治机制的研究-4-

1.2.1生防菌定殖的研究进展-4-

1.2.2生防菌对植株防御酶系统的研究进展-5-

1.2.3生防菌定殖土壤微生态的研究-5-

1.2.4根系提取液对生防菌的研究-6-

1.3番茄青枯病植物疫苗研究及其应用前景-6-

1.4本研究的目的及意义-7-

第二章番茄青枯病植物疫苗工程菌的筛选-9-

2.1引言-9-

2.2试验材料-9-

2.3试验方法-10-

2.3.1番茄青枯病植物疫苗工程菌的筛选-10-

2.3.2番茄青枯病植物疫苗工程菌的接种浓度对番茄青枯病防效的影响-10-

2.3.3番茄青枯病植物疫苗的接种时间对番茄青枯病防效的影响-11-

2.3.4番茄青枯病植株病原菌的的分离及鉴定-11-

2.3试验结果-12-

2.3.1番茄青枯病植物疫苗菌株的筛选-12-

2.3.2番茄青枯病植物疫苗工程菌FJAT-1458的接种浓度对番茄青枯病防效的影响-14-

2.2.3番茄青枯病植物疫苗工程菌FJAT-1458的接种时间对番茄青枯病防效的影响-15-

2.3.4试验获得番茄青枯病植株病原菌的的鉴定-16-

2.4讨论-17-

第三章植物疫苗工程菌FJAT-1458在番茄植株的定殖特性-18-

3.1引言-18-

3.2试验材料-18-

3.2.1供试菌株-18-

3.2.2培养基-18-

3.2.3供试番茄-18-

3.3试验方法-18-

3.3.1菌液的制备-18-

3.3.2植物疫苗工程菌FJAT-1458在番茄植株不同部位的定殖数量-19-

3.3.3植物疫苗工程菌FJAT-1458在番茄不同生长期的定殖数量比较-19-

3.3.4土壤青枯雷尔氏菌的分离-19-

3.3.5植株体内青枯雷尔氏菌的分离-19-

3.3.6植株体内分离的青枯雷尔氏菌的分子鉴定-20-

3.4结果与分析-20-

3.4.1植物疫苗工程菌FJAT-1458在番茄植株不同部位的定殖数量-20-

3.4.2植物疫苗工程菌FJAT-1458在番茄不同生长期的定殖数量比较-21-

3.4.3植株体内分离的青枯雷尔氏菌的分子鉴定-23-

3.5讨论-25-

第四章植物疫苗对番茄青枯病免疫抗病的生理机制-27-

4.1引言-27-

4.2试验材料-27-

4.2.1供试菌株-27-

4.2.2培养基-27-

4.2.3供试番茄-27-

4.3试验方法-27-

4.3.1植物疫苗工程菌FJAT-1458胁迫接种和取样方法-27-

4.3.2生物指标测定-28-

4.3.3酶活性的测定-28-

4.3.4数据统计分析-28-

4.4结果与分析-28-

4.4.1植物疫苗胁迫对番茄植株生长的影响-28-

4.4.2植物疫苗胁迫对番茄植株抗氧化酶系活性的影响-29-

4.5讨论-33-

第五章植物疫苗工程菌对不同作物根际土壤微生物群

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