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摘 要 ：目的 建立高效液相色谱法测定柴连辛口服液中连翘苷的含量的方法.方法 采用Alltima C185µ, 250mm×4.6mm色谱柱；乙腈：水(25：75)为流动相；检测波长278nm.结果 连翘苷浓度的线性范围为0.618µ,g-3.09µ,g,r等于0.9999.平均加样回收率为99.37%,RSD等于1.83%.

结论 该方法简便、准确、重复性好.可作为该制剂的定量分析方法.

关 键 词 ：柴连辛口服液 连翘苷 高效液相色谱法

中图分类号：R285 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2011）18-0103-02

我院制剂柴连辛口服液由麻黄、柴胡、广藿香、肉桂、连翘等药味经加工制成,具有解表宣肺、化湿和中的作用.连翘为中医常用的清热解毒药,有清热解毒、消肿散结的功效,具有清热解毒、散结消肿之功效,主治温热、丹毒、斑疹、痈疡肿毒、瘰疬、小便淋闭等症,其活性成分连翘苷为本方的重要有效成分.质量标准中未对连翘苷作鉴别和含量的要求.为有效控制产品质量,保证疗效,笔者参考相关文献,建立高效液相色谱(HPLC)法测定指标成分连翘苷,为柴连辛口服液的质量控制提供参考,获得了较为理想的结果,现报告如下：

1.仪器与试药

Waters高效液相色谱仪、515 泵、2487紫外检测器、717自动进样系统、柱温箱.乙腈为色谱纯,其他试剂为分析纯.连翘苷对照品(中国药品生物制品检定所批号：0821-200104).

2.方法与结果

2.1 色谱条件

Alltima C18 5µ, 250mm×4.6mm色谱柱；流动相：乙腈：水(25：75)；检测波长278nm；流速：1.0ml%•,min-1；柱温：35℃.

2.2 对照品溶液的制备

精密称取连翘苷对照品15.45mg,置50ml容量瓶中,加50%甲醇溶液至刻度,摇匀.

2.3 供试品溶液的制备

精密称取本品约2ml,置中性氧化铝柱(200目,6g,内径1cm,用70%乙醇30ml预洗后备用),加70%乙醇40ml,洗脱,收集洗脱液,浓缩至干,残渣加5%甲醇适量使溶解,转移至10ml容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得.

2.4 线性关系考察

分别配置浓度为0.0618、0.07725、0.1545、0.23175、0.309mg•,ml-1连翘苷标准溶液进样,进样量10µ,l,以峰面积积分值为纵坐标(Y),连翘苷的进样量为横坐标(X)进行线性回归,得回归方程为：Y等于6.2185×106X-8144.2,r等于0.9999,结果显示连翘苷进样量在0.618～3.09µ,g范围内呈良好的线性关系.

2.5 精密度试验

精密吸取对照品溶液10µ,L,重复进样5次,测得对照品溶液峰面积,计算RSD等于0.6%,(n等于5)表明精密度良好.

2.6 稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液10µ,L,分别于0、6、12、18、24h进样测定,结果24h内测定结果稳定,RSD等于2.77%(n等于5).

2.7 空白实验

按处方制备缺连翘的阴性样品,再按供试品溶液制备方法制备成阴性样品溶液.按样品测定方法测试,结果在连翘苷对照品峰处未出现色谱峰,说明按本文的实验条件测定,缺样空白无干扰.

2.8 重复性试验

取同批样品(批号为07022111)5份,按样品测定项下方法测定,结果RSD等于1.20%,结果表明本方法重现性较好.

2.9 加样回收试验

精密量取已知含量的柴连辛口服液(样品含量为0.404mg•,ml-1)适量5份,分别置中性氧化铝柱(200目,6g,内径1cm,用70%乙醇30ml预洗后备用)上,各精密加入对照品适量,照供试品溶液制备法制备,测定连翘苷的含量.平均回收率为99.37% RSD等于1.83%(n等于5),测定结果(见表1).

怎样写连翘本科论文
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表1 加样回收率实验结果

称取样品量/ml 样品中连翘苷含量/mg 加入连翘苷量/mg 测得量 回收率% 平均回收率% RSD%

1.00 0.404 0.3708 0.781 101.67 99.37 1.83

1.00 0.404 0.3708 0.765 97.30

1.00 0.404 0.3708 0.769 98.38

1.00 0.404 0.3708 0.770 98.65

1.00 0.404 0.3708 0.778 100.86

2.10 样品测定

取对照品溶液及供试品溶液各适量过0.45µ,m微孔滤膜,每次进样10µ,l,外标法,测定连翘苷含量.批号为07020143,070220