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摘 要:目的:建立野甘草的生药鉴定方法.方法:利用性状、显微、理化鉴别的方法.结果:野甘草茎髓部存在针晶,茎、叶表皮细胞均有非腺毛存在,而且叶表皮存在6~8个细胞组成的腺鳞;主要化学成分为生物碱及黄酮类,生物碱主要分布在根部,黄酮类主要分布在地上部分.结论:本实验建立的方法简便、可行,为野甘草的药材的鉴别及质量标准制定提供依据.

关 键 词:野甘草;性状鉴别;显微鉴别;理化鉴别

中图分类号:R284.1文献标识码:A

文章编号:1007-2349(2012)02-0052-03

野甘草又名冰糖草、香仪、假甘草等,为玄参科植物野甘草(ScopariadulcisL.)的全株,主要分布在广西、广东、福建、台湾等地,具有清热解毒,疏风止咳,利尿消肿的功效[1].我国主要用于治疗感冒发热、肺热咳嗽、暑热吐泻、脚气浮肿、小儿麻疹、湿疹、热痱、高血压和丹毒等证[2].目前,国内外对野甘草的研究集中在化学成分及药理作用方面[3~4],先后发现了野甘草酸(scopadulcicacid)A、B[5]、野甘草属酸(scoparicacid)A、B、C、野甘草都林(scopadulin)[6]等活性成分,但尚未见野甘草生药学方面的研究报道,本文就其生药学特征展开研究,为该药的鉴别、质量控制和进一步的开发利用提供依据.

1仪器与试剂

XSP-ZCA生物显微镜;SK3300H超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);HH-6恒温水浴锅(江苏金坛市宏华仪器厂);YH系列规格1000ml电热器(江苏近湖镇教学仪器厂);ZF-20C暗箱式紫外透射仪(上海顾村光电仪器厂).所用试剂均为分析纯.

2材料与方法

2.1试验材料野甘草采于广东省广州市和肇庆市,经广东药学院药用植物教研室杨全副教授鉴定为玄参科植物野甘草(ScopariadulcisL.).

2.2试验方法运用徒手切片、粉末装片、表面制片方法进行野甘草的显微鉴别;采用试管定性反应及薄层色谱法进行理化鉴别.

3结果与分析

3.1药材性状鉴别主根呈圆锥形,平直或带弯曲,木化,长10~30cm,表面棕黄色,常具侧根,质脆易折断,断面淡黄绿色,皮部薄.茎多分枝,基部圆柱形,黄褐色,上部灰绿色,茎节明显,体轻;嫩茎表面具6条纵棱,质脆易折断,断面髓部中空;分枝由叶腋伸出,光滑无毛.叶片多,皱缩易碎,灰绿色,完整叶浸润展开后为菱状卵形或菱状披针形,叶缘具齿或细小缺刻,网状脉序,草质,两面无毛.花黄白色,生于叶腋处,偶见卵圆形至球形的蒴果,黄褐色,皱缩,多开裂,散出极小粉状种子.


本文来源:http://www.sxsky.net/yixue/0101069114.html

3.2显微鉴定

3.2.1根横切面木栓层由4~5列细胞组成,多呈扁平状,类长方形,排列整齐,往往多层相迭,细胞壁木栓化,呈褐色.皮层较宽,为数层薄壁细胞组成,细胞呈长卵圆形、圆形以及不规则多角形,排列疏松,有明显的细胞间隙,偶见大型裂隙,断续排列成环.韧皮部较狭窄,细胞小而不规则.形成层为2~3列排列整齐的扁平细胞组成.木质部较宽,约占2/3左右,导管多单个散在,偶见几个相连,木射线明显.见图1.

1.木栓层;2.皮层;3.韧皮部;4.形成层;5.木质部

图1野甘草根横切面简图

3.2.2茎横切面茎的横切面略呈圆柱形,有六条纵棱,棱角处为厚角组织.表皮由一列排列整齐紧密、扁平的细胞组成,外壁稍厚,常见由4~5个细胞组成的非腺毛.皮层所占比例较小,细胞大,壁薄,多为球形或椭圆形,排列疏松,靠近表皮的细胞具有叶绿体,有断续排列成环状的不规则小型裂隙.维管束为外韧型,呈放射状排列,韧皮部较狭窄,约占茎的1/8,由筛管、伴胞、韧皮薄壁细胞和韧皮纤维组成,细胞小且不规则.木质部比例较大,约占茎的1/4,由导管、管胞、木薄壁细胞和木纤维组成.髓部较宽,约为茎的1/2,呈类三角形,常有针晶束分布.见图2.

1.表皮;2.厚角组织;3.裂隙;4.皮层;5.韧皮部;6.木质部;7.髓

图2野甘草茎的横切面详图

3.2.3叶片横切面上下表皮细胞各一列,排列紧密,均有气孔和腺鳞分布,上表皮细胞较大,外壁厚,多不规则,下表皮细胞类方形.栅栏组织1列,细胞内含有大量叶绿素,与海绵组织分化明显.主脉维管束为半月形,外韧型,维管束上下方均有厚角组织,木质部位于向茎面,导管呈放射状径向排列.见图3.

1.非腺毛;2.厚角组织;3.下表皮;4.韧皮部;5.木质部;

6.海绵组织;7.气孔;8.栅栏组织;9.上表皮;10.腺鳞

图3野甘草叶片横切面图

3.2.4叶表皮片上下表皮细胞不规则,侧壁(垂周壁)呈波浪状,彼此互相嵌合,有腺鳞分布,由6~8个细胞组成;上表皮气孔器为不定式,下表皮为不等式,偶见直轴式.见图4.

AB

A.上表皮,B.下表皮1.腺鳞,2.气孔,3.表皮细胞

图4野甘草叶片上下表皮片

3.2.5粉末灰绿色,淀粉粒多为单粒淀粉,偶见复粒,直径10~30μm.导管多为螺纹导管,直径20~34μm.纤维有2种,一种细长,壁厚,另一种壁薄,两头稍尖,直径12~32μm.腺鳞成群存在,腺头由6~8个细胞组成,直径85~120μm.非腺毛偶见,由3~4个细胞组成.可见木栓细胞碎片,细胞呈正方形及多角形.见图5.

1.淀粉粒,2.螺纹导管,3.非腺毛,4.腺鳞,

5.纤维管胞,6.纤维,7.木栓细胞

图5野甘草粉末图

3.3理化鉴别

3.3.1显色试验

3.3.1.1生物碱类成分鉴别取本品根部粉末6g,用40mL乙醇加热回流2h,过滤,滤液加热浓缩至10mL过滤,滤液用3倍量水稀释后加30mL乙酸乙酯萃取3次,合并乙酸乙酯层,水浴蒸干,残渣用4mL乙醇溶解.溶液置于3支试管中,1号试管加入2mL苦味酸试剂,有黄色沉淀产生;2号试管加入2mL碘化铋钾试剂,有黄棕色沉淀产生;3号试管加入2mL碘-碘化钾试液中,有红棕色沉淀产生.

3.3.1.2黄酮类成分鉴别取本品地上部分粗粉10g,用60mL95%乙醇加热回流2h后蒸馏水稀释至含醇量为70%,滤过,滤液用石油醚萃取,水浴蒸干,加30mL50%乙醇溶解,25mL水饱和正丁醇洗涤2次,取水层水浴蒸干,加4mL乙醇溶解[7].吸取0.5mL上述样品溶液乙醇稀释至2mL,加少量的镁粉,滴入2滴浓盐酸,溶液显红色.用毛细管吸取上述样品溶液约4μL,点于滤纸上,晾干,喷1%的三氧化铝乙醇试液,热风吹干,置于紫外365nm下观察,显鲜黄色荧光.


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3.3.2薄层色谱鉴别

3.3.2.1黄酮类薄层层析①根部供试液制备:取根部粉末2g,用20mL乙醇加热回流2h,过滤,滤液加热浓缩至约2mL;②地上部供试液制备:取对照样品粉末3g,用30mL乙醇加热回流1h过滤,挥干滤液,用2mL甲醇溶解;③对照样品制备:取对照样品粉末4g,具体方法参考3.3.1.2.取上述供试液各1μL,点于同

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一聚酰胺薄层板上,以乙酰丙酮-乙醇-丁酮-水(1∶3∶3∶13)为展开剂,展开,晾干,喷1%三氯化铝乙醇试液,吹干,置紫外灯下检视.②和③供试液在Rf值为0.53、0.33处呈现蓝色荧光斑点,Rf值为0.56、0.47、0.40处呈现亮黄色荧光斑点,①供试液黄色荧光斑点不明显.


本文为全文原貌未安装PDF浏览器用户请先下载安装原版全文3.3.2.2生物碱类薄层层析根部及地上部供试液制备方法参考3.3.2.1;对照样品制备同3.3.1.取上述供试液各8μL,点于同一聚酰胺薄层板上,氯仿-环己烷-甲醇(19∶1.5∶1)为展开剂,展开,取出晾干.①依次喷碘化铋钾和亚硝酸钠乙醇试液,105℃烘至斑点清晰[8],根部及对照样品在Rf值0.35、0.65处呈现红棕色斑点,地上部分未见斑点;②取同条件下展开后的薄层色谱,喷1%钼酸钠硫酸试液,105℃烘至斑点清晰[8],3种供试液均在Rf值0.64处呈现蓝色斑点,根部和对照样品更清晰.

4结论与讨论

显微鉴别中,野甘草茎的髓部存在草酸钙针晶束.叶片为异面叶,上下表皮均有腺鳞和非腺毛存在,气孔轴式为不定式和不等式.理化鉴别初步判断野甘草的主要化学成分为生物碱、黄酮类化合物.其中,生物碱类主要分布在根部,黄酮类主要分布在地上部分.参考文献:

[1]中药大辞典编纂委员会.中药大辞典[M].下册.上海:上海科学技术出版社,2006:2954.

[2]李宗友,倪暮云.野甘草的化学、药理[J].国外医学中医中药分册,1994,16(2):11~

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