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0;降解研究.

2.基因工程菌的构建

基因工程菌的基本构建过程为：从染色体或降解性质粒中选取起关键作用的基因片段,将其接种在适当的载体上,一同移入受体菌中,此时受体菌便有了新的降解功能.将所选取的基因片段转入受体菌的主要方法有：接合型质粒转移、整合型质粒转移和重组质粒转化.

2.1接合型质粒转移(injugetiveplasmidtransfer)

接合型质粒转移指通过供体细胞与受体细胞的紧密接触,使质粒转入受体细胞当中,使基因通过细菌间的有效接触而发生的横向转移的过程[12].ChatterieeDK等将恶臭假单胞菌的TOL质粒pWWO接合到某一细菌的驯化菌株中,该细菌能将TNT苯环上的3个硝基氧化脱除,并利用其作为氮源来满足生存需要,获得的菌株既可以氧化消除硝基又可以降解甲苯,将TNT作为生存所需的碳、氮源,从而使其矿化.

2.2整合型质粒转移(integrativeplasmidtransfer)

将降解目的所需的基因连接到可整合基因的质粒(含F因子)上,之后一同移入受体菌中,使该基因片段永久性留存于受体菌的染色体上,使基因所表现的降解性能可以稳定遗传.

在用于耕作土壤中,Ka等研究发现了新的2,4-D-降解菌株,并从中分离出了可自我遗传的降解性质粒-,4-D.其中质粒pKA2在菌株2811P上.分离出最初驯化的2811C菌株,观测到所有pKA2质粒均已整合到受体菌染色体上,没有破坏2,4-D的性状.

2.3重组质粒的转化(rebinantplasmidtransfer)

重组质粒是指向一个质粒中同时转入多个有不同降解能力的基因片段,使受体菌可同时降解多种芳香烃,扩大了菌种的可降解范围、增强了菌种的降解能力.

五、存在的问题及展望

综上所述,在实验研究中,复合菌剂的使用,以及基因工程菌的构建,均可大大提高芳香烃类化合物的降解效率.但是当将复合菌剂应用于现实环境中芳香烃类化合物的降解时,就会出现降解系统中高效菌的降解活性下降、存活能力差及菌群间出现竞争等问题.此外,关于基因工程菌方面,国内单纯研究了各种降解性质粒,国外已构建出一些基因工程菌,但由于其安全性问题,目前尚未投入工业化生产.

因此,如何解决以上问题,使复合菌剂以及基因工程菌能真正用于解决环境问题,快速、彻底的降解对环境造成危害的芳香烃类化合物,仍有待进一步的研究.

参考文献

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[3]邓琦.常萍.周围.程国军.芳香烃化合物降解菌CP5的降解特性及降解基因[J].华中农业大学学报.2010,29(2):185-188.

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