中国农业相关论文例文,与树莓炭疽病病原菌鉴定相关论文参考文献格式

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摘 要： 【目的】为了明确引起树莓炭疽病的病原,【方法】从30份标样中采用组织分离法分离得到了18个代表性菌株,并随机选取一个菌株LN-14,对该菌株的形态学特征、菌落特性以及病菌的致病性进行了研究.采用真菌rDNA-ITS区域通用引物ITS1和ITS4对菌株进行PCR扩增,运用DNAMAN软件构建该菌株与其他近缘种类菌株的系统发育树.【结果】该菌在PDA培养基上菌落呈灰白色,产生黑色分生孢子盘,分生孢子无色、单孢子呈椭圆形12～19 μm×4～5 μm .PCR扩增得到534 bp的特异性片段,测序、比对结果显示该菌与Colletotrichum gloeosporioides[HQ264183]、C. gloeosporioides[HQ264182]的相似性高达100%,与引起杧果炭疽病的C. gloeosporioides[JX560098]亲缘关系较近聚类为同一个分支,而与草莓炭疽病菌C. fragariae[JN943084]亲缘关系较远.【结论】形态学和分子鉴定表明辽宁地区树莓炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）.

关 键 词 ： 树莓； 炭疽病； 病原鉴定； 胶孢炭疽菌

中图分类号：S663.2 文献标志码：A 文章编号：1009-9980?穴2013?雪04-0672-03

树莓（Rubus idaeus L.）为蔷薇科（Rosaceae）悬钩子属（Rubus L.）多年生落叶果树,小灌木.树莓属有700余种,主要分布于北半球温带、亚热带地区,在我国发现约200余种[1].我国目前栽培的品种多由国外引入,随着树莓的大量种植,树莓病虫害的发生日趋严重.

树莓炭疽病是树莓上的一种十分重要的病害.笔者从2010—2012年间,分别在沈阳、丹东、营口、庄河等地的树莓基地进行了病害取样调查,发现在7—9月份该病害普遍发生,高温高湿天气发生尤为严重,该病主要危害叶片,在生长后期也可危害果实,严重影响树莓的产量和品质.到目前为止,引起该病害的病原菌种类尚未见文献报道.由于炭疽菌属真菌种类繁多、分布广泛,形态差别细微,该属某些种类在分类学上尚无定论,仅从形态学特征上很难对该属真菌进行种间的分类鉴定[2].我们通过对病原菌的形态学分析结合rDNA-ITS序列分析的方法对引起树莓炭疽病的致病菌的进行鉴定,为该病害的进一步系统研究奠定基础.

1.材料和方法

1.1 树莓炭疽病病害标样的采集

2010年7月中旬至9月末,在辽宁果树所树莓苗圃以及沈阳东陵树莓基地采集树莓炭疽病发病叶片标样30余份,分离得到代表性菌株18份于4 ℃冰箱保存备用.

1.2 病原菌分离及形态学鉴定

对采集的病叶采用组织分离[