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【摘　要】本论文对食用玫瑰花中的生物类黄酮的提取工艺进行研究,并通过一系列的乙醇提取单因素实验和正交实验,得到了食用玫瑰黄酮提取的最佳工艺,即固液比1:20,pH值为7.80的乙醇浓度为70%,温度为80℃,提取时间120min.为食用玫瑰工业化的生产研究提供理论基础.

【关 键 词】食用玫瑰黄酮提取

前言

玫瑰,学名Rosarugosa,别名红玫瑰、梅槐、刺玫瑰,蔷薇科,蔷薇属,落叶直立灌木.食用玫瑰中含有丰富的黄酮类化合物,黄酮类化合物作为一种功能成分,具有增强心血管功能、抗肿瘤、增强免疫力、延缓衰老等作用.在国外,近年来对黄酮类化合物的研究开发十分活跃,但在国内保健食品生产中开发较多的只有银杏黄酮、山楂黄酮、茶叶黄酮等[1].

本论文以食用玫瑰为研究对象,对食用玫瑰中生物类黄酮的提取工艺进行初步的研究和评价,希望我们的研究能为进一开发天然高效食品抗氧化剂、食品添加剂、研制功能性食品及开发医药材料提供理论指导.

1.实验材料、主要药品、仪器及实验方法

1.1实验材料

玫瑰花:本研究所采用的实验材料为新鲜的食用玫瑰花

1.2实验主要仪器设备

索氏抽提器,电子分析天平,紫外可见分光光度计,旋转蒸发仪,高速离心机,真空泵,恒温循环水箱,电热干燥箱,恒温搅拌循环水浴锅,PHS-2S酸度计,酒精度计等.

1.3实验主要试剂

芦丁、没食子酸、棚皮素标样；乙醚、乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇、冰乙酸柠檬酸、氢氧化钠、氢氧化钙、三氯化铝、亚硝酸钠、硝酸铝（以上均为分析纯）；

1.4食用玫瑰黄酮的测定方法

采用比色法[2],AlCl3与黄酮类物质作用后,生成黄酮得到黄色铝络合物.

1.5食用玫瑰花黄酮提取工艺的研究[3]

1.5.1黄酮提取单因素实验[4]

（1）提取方法筛选试验

①乙醇索氏抽提法

准确称取5.00克玫瑰粉,用滤纸包好放入索氏抽提器中,加入100mL95%乙醇90℃抽提1h,定容,测定黄酮萃取率.

②丙酮浸提法

准确称取5.00克玫瑰粉,用100mL80%丙酮80℃回流浸提1h,抽滤,用80%丙酮洗涤滤渣至洗涤液无色,定容,测定黄酮萃取率.

③热水提取法

准确称取5.00克样品,加入100mL蒸馏水,90℃浸提1h,定容,测定黄酮萃取率.

④碱溶酸沉法

准确称取5.00克样品,加入100mL蒸馏水,煮沸,在搅拌条件下缓慢加入石灰乳调节pH值为9.0,在此条件下,微沸60min,趁热滤布过滤,用90℃蒸馏水洗涤滤渣至洗涤液无色,合并滤液与洗涤液,在60～70℃下用HCl溶液调节pH值至5.0,搅匀,静置24h,抽滤,用蒸馏水洗涤沉淀物至中性,真空浓缩干燥得粗提物,用60%乙醇配制成样品液,定容,测定黄酮萃取率.

（2）乙醇浓度对黄酮浸出率的影响试验

准确称取5.00克食用玫瑰,用l00mLpH8.15的不同浓度乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同浓度乙醇的黄酮浸出率.

（3）浸提温度对黄酮浸出率的影响试验

准确称取5.00克食用玫瑰,用l00mLpH8.15的50%乙醇溶液,在不同温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同浸提温度的多测定黄酮浸出率.

（4）浸提时间对黄酮浸出率的影响试验

准确称取5.00克食用玫瑰叶,用l00mLpH8.15的50%乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提不同时间,抽滤,定容,测定不同浸提时间的测定黄酮浸出率.

（5）料液比(m/V)对黄酮浸出率的影响

准确称取5.00克食用玫瑰,分别用不同体积的pH8.15的50%乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同料液比的测定黄酮浸出率.

（6）浸提溶剂pH值对黄酮浸出率的影响实验

准确称取5.00克食用玫瑰,用100mL不同pH值的50%乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同溶剂pH值的测定黄酮浸出率.

（7）正交实验

对影响黄酮浸出率的乙醇浓度、浸提温度、浸提时间、料液比(m/V)、浸提溶剂pH值进行正交试验,试验的因素水平如表所示,以黄酮浸出率为指标,优化浸提工艺条件.

表正交实验因素水平表

2.结果分析

2.1食用玫瑰花总黄酮检测方法的建立

在碱性溶液中,黄酮类化合物与衬Al3+生成红色络合物,用芦丁试验结果表明在420nm波长处有最大吸收峰.同时分析得到标准曲线的回归方程,为Y等于0.0007x+0.0362,r等于0.9998,表明在100～800цg/mL浓度范围内,浓度与吸光度有良好的线形关系.

2.2食用玫瑰花黄酮类化合物提取工艺的研究

2.2.1几种常用的提取方法比较

不同提取方法对食用玫瑰黄酮的萃取率如表1所示.回流浸提法还可通过调节乙醇浓度,增加食用玫瑰黄酮的的溶解性,提高提取效率,因此,选择乙醇浸提工艺.

2.2.2乙醇浓度对黄酮浸出率的影响

不同乙醇浓度对食用玫瑰黄酮浸提效果表明,当乙醇浓度小于40%时,浸出物中黄酮的浓度随乙醇浓度的增加而迅速提高.高于此浓度后则增长平缓.当浓度达到80%时,黄酮提取率基本不变.因此,宜采用70%

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2.2.3温度对黄酮浸出率的影响

不同浸提温度的黄酮浸出率表明,不同浸提温度的黄酮与多酚浸出率差异极显著.40～80℃时,随着温度的升高黄酮与多酚浸出率逐渐增大,这是因为升高温度有利于食用玫瑰黄酮溶解度增大[5].宜在60～80℃之间进行浸提.

2.2.4浸提时间对黄酮浸出率的影响

不同浸提时间的黄酮浸出率如图.不同浸提时间的黄酮浸出率差异极显著.浸提时间在60～150min之间时,延长时间可以增加玫瑰黄酮浸出量,提高黄酮浸出率.当时间超过150min时,玫瑰中的黄酮向溶液扩散速度与溶液中黄酮向玫瑰扩散的速度达到平衡,高温长时间的蒸煮使黄酮部分损失,黄酮浸出率降低.

2.2.5料液比(m/V)对黄酮浸出率的影响

不同料液比的黄酮浸出率如图4所示.方差分析表明,不同料液比之何差异极显著.料液比小于1：20,增大黄酮浸出率.当溶剂用量增大到一定限度时,而减少玫瑰黄酮浸出,因此,料液比1:30的黄酮浸出率比料液比为1：20的黄酮浸出率低.

2.2.6溶剂的PH值对黄酮浸出率的影响

不同溶剂pH值的黄酮浸出率显示说明,因为类黄酮含有酚羟基,所以碱性乙醇溶液有

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