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模型相关论文范文文献,与创伤愈合动物模型的进展相关论文答辩
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创伤愈合,一直是医学研究中最重要的课题之一.然而,其相关的研究进展却长期受限于以下两方面因素的影响：①缺乏合适的异常瘢痕形成的动物模型；②缺乏敏感的能定量反映创伤和创伤修复的方法.动物模型对于创伤愈合研究来说,其重要性不容置疑.就如同发生在人类的其他各系统疾病一样,要深刻认识它们的本质,了解其相应病理改变或测试某一种药物或治疗方法对其是否有效和安全,都应该先在相应的动物实验模型上进行研究和验证,然后才能在临床上应用和推广.可以认为,现代医学的发展离不开动物实验模型的广泛应用.近年来,在创伤愈合领域,关于动物实验模型的研究有了一些新的进展和成果报道,本文在复习文献的基础上,综述如下.
1动物模型的选择原则
一般动物模型的选择,应该注意以下几点基本原则：①能正确复制所要研究的损伤或病变；②可以多次或用多种方式进行实验；③实验可被别人重复；④在实验中可获取多个活检标本；⑤容易操作并与动物实验设备相适应；⑥有可供实验观察的足够时间.而在创伤愈合研究中,动物模型的选择需要更加精准和确切.对于不同的创伤愈合类型或是同一愈合类型中不同阶段某个具体问题的研究,应该由与之对应的或相似度最高的不同实验动物模型来进行.例如：在研究烧伤创面愈合的收缩增强过程时,选用小鼠烧伤模型较佳.而在研究创伤修复的再上皮化过程时,刃厚皮片供区的创面愈合模型或点状植皮动物模型均被认为是合适的选择.
2急性伤口愈合模型
急性伤口愈合模型(modelsofacutewoundhealing),是指创伤发病急、致伤因素较为明确、病程相对较短,不伴有其他明显影响愈合的有害因素存在,创口以急性炎症反应为特征的一类创伤愈合模型.
2．1切开性伤口模型：通常是用剪刀或刀片切割动物皮肤,形成线形切口,可深至皮下.常用的动物有鼠、兔或猪等,切口常选在动物的背部或腹部.这一模型可用于观察伤口愈合过程以及各种全身或局部使用的药物、敷料等对伤口愈合的影响作用.另外,此模型还常被用来研究愈合创面的抗张力强度(tensilestrength),其传统方法是在伤口愈合过程中不同时间点上分别切取创面标本,再用表面张力计测量其张力强度,后作比较和分析.这种方法作为一种体外性测试,并且测量值是通过与切口垂直方向的单向拉力来获取,因而与切口实际的多轴向力学作用相比还存在着一定差异.Gingrass等设计了一种活体测量伤口张力强度的动物模型,其方法是通过真空负压装置作用于SD大鼠的线形切口区,依靠吸引作用产生多轴向拉力.其相关实验研究证实,这一模型的测量参数更接近临床实际,结果也更为确实可信.
2．2切除性伤口模型：使用特制的打孔器或剪刀、刀片在动物体表(多在背部)切除一定面积的皮肤全层或断层组织而制备.人体开放性创伤愈合过程的各个阶段,包括肉芽形成、胶原沉积、再上皮化和收缩过程等,都可以在这一模型中进行模拟和观察研究.各种局部用药或敷料等的疗效测试以及一些影响愈合的外界因素的作用分析,也都可以利用此实验模型来进行.由于不同深度的开放性伤口有着不同类型的愈合方式,模拟制备的相应动物伤口模型,也就大致可分为两种：即部分厚度的切除伤口模型和全厚切除伤口模型.部分厚度(保留部分真皮层)的切除伤口模型,或称断层皮肤切除伤口模型,一般是用标准取皮刀在皮肤相对较厚的动物身上制备而成.与人类皮肤结构近似的小猪或小香猪,使用最为广泛.这一模型特别适用于再上皮化过程的研究,其评价指标主要是创面的再上皮化率与创口的实际闭合时间.全层厚度的皮肤切除伤口模型,动物的选择和制作方法基本同上.它被广泛地用于衡量影响创伤修复的各种因素的作用,如不同类型的敷料、皮肤替代品及局部用药等都可以在此模型上进行观察和研究.另外,因伤口收缩的程度在动物皮肤和人体皮肤之间有较大的差异性,如啮齿类的小鼠,伤口的愈合90％依赖其伤口收缩作用,为了增加动物模型与人体创伤愈合过程的相似度,在制作模型时,就可以采取各种方法来尽量减低这一因素的差异.Carlson等在制作的小鼠切口模型两侧,用类似夹板样固定的处理方式,一定程度上有效地限制了其伤口收缩作用.而Mustoe等在1991年所报道的兔耳创伤模型的建立,也是利用兔耳腹侧皮肤下方软骨所产生的类夹板样作用对伤口收缩的限制,从而使对肉芽组织形成和再上皮化等愈合过程的研究更利于开展和深入.近年来,Falanga等在小鼠尾部制作的全层切除伤口模型,Mustoe等.在小鼠头顶部制作的切口模型,原理和方法&#
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2．3烧伤伤口模型：烧(烫)伤动物模型的研究进展较快,各种深度烧伤模型的制备,都有不少的方法可供选用.就创伤愈合研究而言,首先,动物的选择应该是与人皮肤组织结构相似的猪、狗和大小鼠、豚鼠等较好；其次,建立烧伤模型的方法可选用火焰烧伤(凝固汽油、酒精等)和辐射烧伤(溴钨灯、闪光粉等)这两大类,具体可根据实际研究需要而定.而烫伤模型还可选用热金属烫灼法、点状温热烫伤法和热水(蒸汽)烫伤法等.相对来说,烫伤的温度容易控制,作用均匀、面积也易掌握,一般比烧伤模型稳定、准确、重复性好.在制作模型时还应研究和关注的是：①动物体表烧伤面积的准确估计,往往容易将其数值估计过高；②一定体表面积烧伤的动物,是否能引起与人体相似的全身性系统反应.此外,由于人体深度烧伤在临床上通常采用局部切除加皮瓣(片)移植的治疗方式,其相关的动物模型研究也在逐步开展中.
3损伤伤口愈合模型
损伤伤口愈合模型(modelsofimpairedwoundhealing),是指在创伤愈合过程中,由于受到或合并存在影响愈合的各种体内外因素的制约,如营养不良、感染、局部缺血、糖尿病、静脉瘀滞不畅、压力相关因素以及辐射损伤等所造成的以慢性难愈合创面为基本表现的一类动物模型.下面,我们将其中几种较为常用、研究也相对较多的模型及其进展介绍如下：
3．1感染伤口模型：这一模型的制作过程并不复杂,只需将一定量已知浓度的某种致病菌加到动物的伤口创面,再定时检测伤口组织的病理学改变并进行创面细菌计数.由于伤口细菌感染对组织修复的影响,也有其双重性的作用存在,即大量重度的感染明显延迟愈合,少量轻度感染常能加快愈合,故细菌的局部作用浓度是一个关键性要素.付小兵等认为,一般细菌计数超过lOs个／g组织创面愈合将发生困难,而在动物细菌计数还需要更高一些.Kendra等在小鼠烫伤感染模型的相关研究中,将200～300CFU的绿脓杆菌注射接种于5mm×5mm的烫伤创面皮下,获得了较理想的模型效果和可重复性的实验结论.
3．2局部缺血伤口模型：局部缺血伤口模型的制作
方法,大致可以分为两类：一类是通过血管结扎方式来制备,Mustoe等将兔耳腹侧面的三条供血动脉其中两条结扎而制成的兔耳局部缺血模型,对于研究慢性创伤愈合过程中各种治疗手段或处理因素的作用和意义可算是一种上佳的动物模型；另一类方法则是运用皮瓣形成的原理来制备,即通过增加其长宽比例来使皮瓣远端形成缺血性改变.许多研究者设计了如双蒂皮瓣或单蒂肌皮瓣等各式各样的皮瓣模型,为不同实验的实际需要提供了多种选择和参考.
3．3糖尿病溃疡模型：欲制备糖尿病溃疡的动物模型,首先需要获得患糖尿病的实验动物.而这就有两种方法可供选择：①用化学药物(如四氧嘧啶等)破坏正常动物胰腺B细胞来获取,如人工糖尿病大鼠等.此方法有其缺点,一是不同动物之间的血糖难以确保处于同一水平,需经常检查血糖；化学药物对T细胞和单核巨噬细胞功能产生的影响,会不可避免地在一定程度上干扰创伤愈合的过程.②直接选用基因突变型的遗传性糖尿病大、小鼠或灵长类动物,这其中使用较多的是纯合突变的db／db小鼠,它由于缺乏leptin受体而致
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