甘薯类有关论文例文,与转AtNDPK2基因甘薯的耐盐性鉴定相关论文摘要

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摘 要：以转AtNDPK2基因甘薯植株为试材,根据其生理指标及表型变化来鉴定转基因甘薯的耐盐性.室内鉴定结果表明：在100、150mmol/LNaCl胁迫下,转基因株系JN1～JN6的根长显著高于对照.田间鉴定结果表明：在50mmol/LNaCl胁迫下,转基因株系JN1～JN6生长正常,而对照10d后出现黄叶及枯萎等症状；在100mmol/LNaCl胁迫下,对照植株和JN2～JN6在处理4d后出现枯萎,而JN1生长正常.

怎么写甘薯硕士毕业论文
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关 键 词：甘薯；转基因；AtNDPK2；根长；耐盐性

中图分类号：S531.034文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）02-0029-03

甘薯是重要的粮食作物及新型能源作物,我国甘薯种植面积占世界甘薯种植总面积的69%,产量占世界总产量的85%.在甘薯生产中,各种环境胁迫和病虫害对其产量和品质危害很大.世界范围内,适宜耕作的土地已经不足10%,很多作物包括甘薯都种植在干旱、盐渍、低温等逆境环境中,随着耕地的不断减少和能源压力的不断增大,培育出能够在逆境生长且品质优良的甘薯品种成为甘薯育种工作者的重要任务.

虽然常规甘薯育种技术在品种改良中发挥了重要作用,但由于种质基础日益狭窄,甘薯种内、种间杂交不亲和性等因素[1],使常规育种受到限制.利用植物基因工程技术能够克服常规育种中存在的物种隔离和基因连锁等妨碍,对甘薯品种选育和生产具有潜在的推动意义.

1材料与方法

1.1试验材料

供试材料为济薯21试管苗,由山东省农业科学院作物研究所提供.转基因植株为转AtNDPK2基因的济薯21再生苗.将再生的转基因小植株切下,MS固体培养基上培养,培养条件为（27±1）℃、光照13h/d.每2个月继代1次.

1.2再生苗的分子鉴定

甘薯总DNA的提取方法按照Saghai-Maroof等（1984）[2]的方法.模板DNA为被检测拟转基因植株总DNA、非转基因植株总DNA（阴性对照）和pCAMB2300-AtNDPK2质粒（阳性对照）.AtNDPK2基因的引物序列为：5′-GTTGGCCGCATTTCGTCCTCA-3′；5′-CCACTTGCATAGCTCGCCCTC-3′,预计扩增片段长度1205bp.NPTII基因引物为5′-GAGGCTATTCGGCTATGACTG-3′；5′-ATCGGGAGCGGCGATACCGTA-3′,预计扩增片段长度750bp左右.PCR反应条件为：94℃预变性5min；94℃变性1min,60℃（NPTII和AtNDPK2）复性1min,72℃延伸1min,30个循环；72℃延伸10min.PCR产物在1%琼脂糖凝胶上电泳,紫外成像仪中观察并拍照.

1.3转基因植株的室内鉴定

选取均匀一致的转基因植株JN1～JN6及对照,切取茎尖顶端2～3cm,分别转接到含0、50、100、150mmol/LNaCl的MS培养基上,28℃、16h/d光照条件下培养20d,测定根长.每个处理5株,重复3次.

1.4转基因植株的田间鉴定

选取均匀一致的转基因植株JN1～JN6及对照,转移到育苗基质中,25℃、1000lx、16h/d光照条件下培养6周后,用0、50、100mmol/L的NaCl溶液进行浇灌,每个处理5盆,重复3次.每隔24h观察植株表型变化.

2结果与分析

2.1转基因植株的PCR检测

PCR检测结果（图1）表明,有11个拟转基因植株及阳性对照扩增出1205bp的条带,初步证明这些植株为转基因植株,阳性率达到84.6%.NPTII基因的扩增结果与AtNDPK2结果类似.

2.2转基