辣椒类研究生毕业论文开题报告范文,与辣椒耐热基因的AFLP相关毕业论文模板范文

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摘 要：用辣椒耐热自交系A11和热敏自交系B22配置杂交组合,通过高温胁迫处理鉴定其F2代分离群体的耐热性.从123对Taq I/Ase I引物组合中筛选出6对多态性好的引物对F2代耐热、热敏植株进行AFLP分析,共扩增出约11 400条清晰条带,其中2条为稳定的差异,初步获得了2个与辣椒耐热性状相关的AFLP分子标记.研究有助于开展辣椒耐热基因的分子标记辅助选择工作,提高辣椒育种效率和水平,并为分离和克隆辣椒耐热相关功能基因奠定基础.

关 键 词 ：辣椒；耐热基因；AFLP分析

中图分类号：Q785；S641.3 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2014）04-0024-03

辣椒（Capsicum annuum L.）原产于中南美洲,属于茄科（Solanaceac）辣椒属（Capsicum）.辣椒是重要蔬菜作物,在世界各地广泛栽培,因其营养丰富、富含维生素C等营养物质而深受人们喜爱[1].我国是世界辣椒种植面积最大的国家,国内的种植面积仅次于大白菜,属于第二大蔬菜作物.近年来,辣椒在华南地区也有了较大的种植面积,但广西、海南等省份地处热带、亚热带地区,四季高温多雨,对辣椒的生长发育造成了极大的影响,当气温高于35℃时,辣椒开花及结实均受到了明显的影响,大大降低了辣椒的品质和产量.近10多a来,已有不少学者对高温胁迫下辣椒的植株形态、生理生化指标进行了研究,但从分子水平系统研究辣椒耐热特性的报道较少[2～6].本研究以辣椒耐热高代自交系A11与辣椒热敏高代自交系B22杂交的F2代植株为材料,进行了耐高温胁迫后,选择耐热和热敏的植株进行AFLP分析,寻找与辣椒耐热性状相关的分子标记,为辣椒耐热相关功能基因的克隆分析及进行分子标记辅助育种提供基础.

1.材料与方法

1.1 试验材料

植物材料为辣椒耐热高代自交系A11与辣椒热敏高代自交系B22杂交的F2代植株,采用大棚栽培和人工气候箱盆栽方式种植.试验所需生化试剂、酶类购自南宁宏泰、Fermentas公司及New Englad公司.AFLP分析所用接头和引物由捷瑞公司合成,相关信息如下.

Ase I 接头序列：5'-TAGGTACGCAGTCTAC-3'； 5'-CTCGTAGACTGCGTACC-3'；Ase I 预扩增引物序列：5'-CTCGTAGACTGCGTACCTAAT-3'；Ase I 选择性扩增引物序列：5'-GACTGCGTACCTAATNNN-3', N 为A、T、C、G 碱基的任意一种.Taq I 接头序列：5'-GACGATGAGTCCTGAC-3'；5'-CGGTCAGGACTCAT-3'；Taq I 预扩增引物序列：5'-GACGATGAGTCCTGACCGA-3'；Taq I 选择性扩增引物序列：5'-GATGAGTCCTGACCGANNN-3',N 为A、T、C、G 碱基的任意一种.

1.2 辣椒叶片总DNA的提取及酶切反应

利用改良SDS法小量提取F2代耐热及热敏辣椒植株叶片的总DNA,对所提取的总DNA分别进行抽提纯化和电泳检测.

利用限制性内切酶Taq I和Ase I对总DNA进行酶切反应,酶切产物回收纯化后备用.

1.3 接