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转基因方面论文范文文献,与动物转基因进展相关毕业论文格式范文
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免疫抗体.奶牛乳房炎是世界范围内危害奶牛养殖业的常见传染性疾病,严重影响产奶量、乳脂率以及牛奶的品质.金黄色葡萄球菌是引起乳房炎的主要病原体之一,目前不论是疫苗还是抗体,都不能很有效地抑制或者抵抗这种微生物.2001年Kerr等[20]将溶葡球菌酶基因转入小鼠乳腺中,高表达该基因的小鼠具有明显的抗菌性,这对于降低奶牛乳房炎的发生率具有潜在的应用前景.Donovan等[21]制备编码溶葡球菌酶基因转基因牛,其乳腺中表达的溶葡球菌酶可以有效预防由金黄色葡萄球菌引起的乳房炎,转基因牛葡萄球菌感染率可降低到14%,而非转基因牛感染率高达71%.Maga等[22]研究表明,转基因山羊表达的重组溶菌酶能有效抑制奶嗜冷腐败菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长.
Pfeifer等[23]将沉默Prp基因的小RNA干扰片断（RNAi）转入小鼠原核细胞核内,获得的转基因小鼠接种感染性朊病毒后,其存活时间长于野生型小鼠.2006年Golding等[9]利用RNAi技术针对引起牛疯牛病和羊痒病的Prp基因序列设计有效的RNAi,获得1头转基因羊胎儿,检测发现RNAi很好地抑制了体内Prp基因的表达.2006年Yu等报道利用基因打靶技术获得敲除了朊病毒一个Prp基因位点的体细胞克隆山羊,经过3个月观察,这些基因敲除羊没有异常表现.2007年Richt等利用基因打靶技术灭活牛的PRNP基因,获得生长发育正常、存活2年以上的转基因牛,它们能够很好地抵抗疯牛病的传染.因此,利用转基因动物制作技术提高动物的抗病性具有十分乐观的前景.
2.2家畜肉产品质量和产量的改良
从畜牧业发展角度出发,创造具有新的遗传性状的动物品系,可以加快改良遗传性状的进程,使选择的效率提高,得到更优质的农产品.1986年Hammer等[24]首次将人生长激素基因导入猪受精卵,成功获得转基因“超级猪”,其日增重、粗饲料转化率、背膘厚度等指标均较正常对照组有明显的提高.1990年Wieghart等[25]将大鼠磷酸烯醇式丙酮酸激酶启动子驱动的牛生长激素基因（PEPCK-bGH）重组载体显微注射早期猪胚胎,培育出的转基因猪的背膘厚度与同窝对照组相比降低了41%.
菠菜根部的FADZ基因编码一种具有将饱和脂肪酸转换为不饱和脂肪酸的酶,2004年日本Kinki大学的Saeki等[26]成功培育出不饱和脂肪酸含量高的FADZ基因转基因猪,其体内的不饱和脂肪酸要比一般的猪高约20%,从而提高了猪肉的质量,同时证明植物基因能够在动物体内发挥作用,并改善动物产品质量.
2.3建立动物生物反应器
将由不同组织特异性启动子驱动的外源基因导入受体细胞并整合其基因组中,细胞分化后发育成的动物个体可以按照人类的需要生产出产物,被称为“活体生物反应器”,包括动物血液系统、动物膀胱、禽类的卵及哺乳动物乳腺等生物反应器.1992年Swanson等[27]制备了血液中含有人血红蛋白的转基因猪,为从动物体获取珍贵的人血有效成分提供了新思路.1998年Kerr等[28]获得能在尿液中表达人生长激素（GH）的转基因小鼠,含量高达0.5g/L.2002年Harvey等[29]成功获得含β-内酰氨酶基因的转基因母鸡,蛋清中含有约3.5g外源蛋白.乳腺被认为是最天然和最有效的外源蛋白生产者,如凝血因子VIII[30]、人凝血因子Ⅸ[14]、人乳铁蛋白[31-32]、人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）[33]、人生长激素（hGH）[34]、人溶菌酶[35]、人促红细胞生成素（hEPO）[36]、人甲状旁腺激素[37]和牛酪蛋白[38]等.
目前,我国用于生产重要的重组蛋白质药物的转基因牛、奶山羊和转基因兔等已相继诞生,这标志着我国在转基因动物制药方面的研究已达到相当的水平,利用乳腺生物反应器大规模生产人类所急需的外源活性蛋白是当前生物技术领域的研究热点之一.
2.4建立人类疾病的动物模型
根据某基因对机体生理状况的影响,建立疾病的转基因动物模型,进而深入研究相关疾病的发病机理,探索其有效的治疗方法,将对医药产业产生深远影响.
人类约有20000~25000个基因,已知的人类疾病有数千种,其中很多是由基因突变所导致的.在20世纪80年代之前,人们
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小鼠等非灵长类动物的解剖学、生理学都明显区别于人类,其作为人类疾病模型具有许多局限性.转基因狨猴是传染病、免疫学和神经障碍性疾病很好的模型,利用含有可导致肌营养不良的突变基因的转基因狨猴为模型,可加快该疾病防治研究的进度[42].2009年Sasaki等制备了含GFP标记基因并可以遗传给后代的转基因狨猴,将应用于生物医学研究的很多领域.
已建立转基因动物模型的人类遗传病包括多种癌症[43]、心脏病[44]、动脉粥样硬化[45]、帕金森病[46]、老年痴呆症[47]、焦虑症和抑郁症[48]等,为人类疾病的研究与治疗提供了强有力的支撑.
3问题与展望
转基因动物的生产及相关产品已显示出了广阔的应用前景与重大的应用价值,然而作为刚刚起步的生物高新技术仍存在一些缺陷,主要问题包括：转基因动物特别是转基因家畜的外源基因整合率及表达效率低；对转基因动物制作的精细理论及整个过程的调控尚不清楚；转入的基因在宿主基因组中的行为难以控制,其插入可能造成内源基因的破坏,还可能激活原本已关闭的基因,从而导致动物出现异常,如阳性个体不育、胚胎死亡、四肢畸形等发育异常现象；转基因动物及其相关产品的安全性有待进一步研究等.
为使转基因动物发挥更大的作用,需要对转基因动物制备技术的各个环节进行不断探索,以提高转基因动物的成功率,包括对不同物种外源基因载体的制备与选择、对基因转移技术的优化、提高体细胞核移植的效率等,最关键的问题是转基因动物的制备是多学科交叉和综合的新技术,相关基础理论是技术突破的瓶颈.因此,各技术与理论的进一步完善和完美结合,将会为转基因动物产业化与商品化铺平道路,并大大推动相关产业的发展.令人鼓舞的是美国FDA在2006年宣布从克隆动物中获得的食品进入食物链是安全的,同年美国GTCBiotherapeutics公司利用山羊乳腺生物反应器生产的重组人抗凝血酶III（商品名：ATryn）获得欧洲药监局批准,Atryn可以阻止遗传性抗凝血酶缺陷症患者体内形成过多血栓；2009年2月6日获得FDA批准上市,该新药的诞生标志着一场生物制药革命的开始.
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[1]WALLRJ.Newgenetransfermethods[J].Theriogenology,2002,57（1）：189-201.
[2]GORDONJW,SCANGOSGA,PLOTKINDJ,etal.Geictransfor-mationofmouseembryosbymicroinjectionofpurifiedDNA[J].ProcNatlAcadSciUSA,1980,77（2）：7380-7384.
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