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生药学类有关论文范文参考文献,与中药鉴定方法学历程相关论文提纲
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、成本低,是首先推荐发展的方法.孙国祥等[31-32]利用数学原理将检测信号转化成易于判别、能揭示潜在化学成分和生物活性特征的数字化信息,建立了中药色谱指纹图谱潜信息特征判据方法和定性、定量相似度评价体系,对深化指纹图谱研究具有启示作用.紫外、荧光、中红外、近红外、拉曼光谱及等离子体光谱（ICP）等光谱技术被大量成功应用到中药材和中药饮片的鉴定研究中[11],其中有些研究具有系统性,如孙素琴等[33]测试了200多种对照药材的红外光谱,姜大成等[34]对16组54种动物药材的红外光谱进行了鉴别研究；李峰等[35]用荧光光谱对16种矿物药进行了鉴别.在这些光谱方法中,现代近红外和拉曼光谱技术由于分析速度快、样品可无需处理或对样品无损,正在发展成一种中药快检和在线监测技术.X衍射技术首次于1997年运用于中药材的鉴定,相比植物和动物类药材的鉴定,在矿物类中药的鉴定效果较好,对于大量矿物类中药能准确鉴定,如张志杰等对我国雄黄药材的成分和晶型用X衍射技术进行了确定[36].2010年版药典新增了ICP光谱法用于中药中有害金属元素的测定[20-21].
色谱-光谱联用技术将具高效分离性能的色谱技术与能获取化学成分丰富结构信息的光谱技术相结合形成的新技术,是新技术的迅速发展和中药理化鉴定方法不断创新的结果.高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）、气相色谱-质谱（GC-MS）、红外光谱-质谱（IR-MS）、质谱-质谱（MS-MS）、气相色谱-付里叶变换红外光谱（GC-FTIR）、高效毛细管电泳-质谱（HPCE-MS）等在中药的品种鉴定与质量评价方面发挥了重大的作用.其中应用最广泛的是液质（HPLC-MS）联用技术.2010年版《中国药典》首次采用液谱-质联用技术（HPLC-MS）控制中药材千里光中的有毒成分和测定川楝子、苦楝皮中既有效又有毒的成分[20,21].
2.5生物鉴定
生物鉴定即对生物特征的鉴定,是对中药所含化学物质的生物效应（药效、活力或毒力）测定或对生命信息物质（核酸、蛋白质、细胞结构等）的识别,以达到品质鉴定目的的一种方法[37].常用的方法有免疫鉴定法、生物效价或生物活性测定法、DNA分子鉴定法、mRNA差异显示鉴定法、细胞生物学鉴定法等[37-39].生物鉴定作为中药鉴定学的一种方法学始见于张贵君主编的2009年版的教材[2].
2.5.1生物效价测定法对活性物质不明确的中药,生物效价或活性测定是评价质量常用的方法.常用的有抗菌效价、免疫作用、抗凝血活性、异常毒性、降压物质的测定以及过敏反应检查法、溶血与凝聚检查法等[37-39].在2010年版药典中,用抗凝血酶活性来评价水蛭药材的有效性；在地黄的鉴别中,采用薄层自显影技术,既达到薄层色谱分离的显色效果,又可同时检测供试品抗氧化的强度[20-21].肖小河等依据中药药性理论和热力学理论,提出基于生物热动力表达的中药质量生物效价评价方法[11].不同中药作用于微生物生长代谢的热功率谱图和热动力学参数可作为中药生物检测的定量指标.以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌等细菌为观察对象,研究了不同种质的板蓝根[40]、不同产地的黄连[41]对菌株的不同生物热力学表达影响,表明该方法可用于鉴定不同品种、不同产地、不同生长年限的药材.2.5.2免疫鉴定法不同动植物药材含有不同的特异蛋白,免疫鉴别即用动植物所含的特异蛋白制备的特异抗体与待检品中的特异抗原结合产生沉淀反应来鉴别药材的真伪.该技术适用于亲缘关系比较接近的动物药的鉴别.丁培贤等[42]采用免疫电泳法及琼脂免疫扩散法准确鉴定了虎、豹等多种动物的骨骼,并能将豹骨进一步鉴定为雪豹、云豹或金钱豹.这说明免疫鉴定方法是一种特异性很强的鉴别法.
2.5.3中药分子鉴定法中药分子鉴定一般是指依据大分子（核酸和蛋白）特征的鉴定.由于中药样品的特殊性,核酸分子鉴定主要集中于DNA分子鉴定,如DNA条形码鉴定技术、基于PCR的分子鉴定技术、基于分子杂交的DNA分子技术等.20世纪90年代,随着生物技术的发展,中药鉴定学与分子生物学相融合,形成了分子生药学这一新兴交叉学科[3].1992—2003年,有60多类型植物药、12个类型的动物药用分子生物学方法进行了鉴别研究,发表了百余篇论文.2000年,黄璐琦等编著了《分子生药学》[39]（2000年第1版,2006年第2版）,该书系统总结和论述了分子生药学的理论和方法.2004年邵鹏柱、曹晖等编著了《中药分子鉴定》一书,着重介绍10余种常用和基本的分子生物学方法及其在中药分子鉴定中的应用,是国内外分子鉴定研究成果的汇总和总结[43].中药分子鉴定技术不仅用于中药不同物种的鉴别,也广泛用于种下不同居群、不同种质资源和地道药材的研究[39],已用于厚朴、芍药、苍术、白芷、栝楼、明党参、半夏等诸多药材的种内及种间关系研究,为中药鉴定提供了遗传学证据.2010年版《中国药典》首次采用了DNA分子鉴定技术用于川贝母及蛇类药材物种的鉴定[20].2010年,陈士林等完成了常用中药材原植物DNA条形码的鉴定研究,编著了《中药DNA条形码分子鉴定》[44],通过研究比较psbA-trnH,matK,rbcL,rpoC1,ycf5,ITS2和ITS等7个候选DNA条形码,发现ITS2是最佳条形码序列.随着中药材DNA条形码分子鉴定方法研究的深入与普及,国家药典委员会讨论通过中药材DNA条形码分子鉴定指导原则列入2010年版《中国药典》增补本[45].
3中药鉴定方法学的发展趋势
早期中药鉴定方法包括来源、性状、显微和理化鉴定四大鉴别法.随着生物技术的发展和安全性评价的需要,又逐渐发展和完善了生物鉴定法.这些方法都在不断发展中,在保证临床用药安全有效方面都有着不可替代的重要作用,对推动中药鉴定学的发展有非常重要的意义.
中药的特点是品种多,其形态和组织千变万化,其化学成分或有效成分复杂.品种多,就需要系统、大规模地比较和分析其鉴别特征,才能准确地把握和鉴别它们.当代学科发展的最大特点是计算科学技术、网络技术和信息技术的渗透,使得中药的系统鉴别特征和方法能够信息化、数据化,便于传播.中药鉴定技术的信息化和系统化发展,有利于它的推广和应用.随着物理、化学、生物学和信息科学的发展,以及仪器分析的手段不断更新,紫外、红外、质谱、核磁共振、气相、高效液相、各种电泳分析法、扫描电子显微镜技术、分子生物学技术、X射线衍射技术、计算机数据和图像处理技术、智能技术等多种技术的组合被吸收运用到中药鉴定方法中,将不断用客观、科学的分析方法,完善和代替主观的分析方法,用准确、精细的分析方法代替粗略笼统的分析方法,不断丰富中药鉴定学的内容,形成以“四大鉴别法”为基础、以生物技术结合理化分析为重点、逐步适应中药现代化并有利于中药走向世界的一套更为科学、完善、先进的中药鉴定体系.各种通用化、标准化、精细化的中药鉴定技术的系统化和信息化发展成为未来中药鉴定方法学发展的方向.
系统生物基因组学、蛋白质组学和代谢组学等多种现代生物技术整体研究方法,有助于帮助人们逐步形成从局部观走向整体观,从线性思维走向复杂性思维,正确认识中药质量.因此,基于系统生物学整体研究的思路和方法建立中药品质整体综合分析模式和生物鉴定方法,将是中药品质评价发展的一项重要研究内容.
中医药历史源远流长.在当前我国大力加强中药研究和加速中药现代化的进程中,中药的准确鉴别仍然是确保中药科研结果可靠,确保中药质量的必不可少的工作.中药鉴定工作者将在继承有价值的传统鉴别技术的基础上,不断研究和发展实用
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