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关于细胞论文范本,与MCM2在非小细胞肺癌的表达意义相关本科毕业论文

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摘 要:目的:探讨微小染色体维持蛋白2(MCM2)在非小细胞肺癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组化法检测72例非小细胞肺癌组织中MCM2的表达,分析MCM2的表达与组织学分型、临床分期及分化程度的相关性.结果:MCM2表达强弱与非小细胞肺癌的组织学分型相关,鳞癌MCM2表达标记指数中位数与腺癌及大细胞癌相比有显著差异(P<0.01);MCM2表达强弱与非小细胞肺癌的分化程度密切相关,分化越低,表达越明显(P<0.01);MCM2表达强弱与非小细胞肺癌的临床分期无关(P>0.05).结论:作为细胞增殖特异性标记物,MCM2的表达与非小细胞肺癌的临床病理特征密切相关.

关 键 词:微小染色体维持蛋白2;非小细胞肺癌;免疫组化

中图分类号:R734.2文献标识码:A文章编号:1008-2409(2007)06-1207-03

TheexpressionandsignificanceofMCM2inthenon-smallcelllungcancer/GONGLi-feng,XIEGuang-shun,RONGJun∥ShandongYantaiNurseSchool,QingdaoUniversityMedicalCollege,Yantai264000,China

Abstract:Objective:Tostudy

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theexpressionofminichromosomemaintenanceprotein2(MCM2)inthenon-smallcelllungcancer(NSCLC)andtherelationshipwiththeclinicalfeatures.Methods:TheimunohistochemicalexpressionofMCM2in72NSCLCspecimensandit'sassociationwithhistology,pathologicstageanddifferentiationgradewereanalyzed.Results:TheexpressionofMCM2wereassociatedwithhistologyofNSCLC,theexpressionofMCM2insquamouscarcinomaswashigherthanthatinlargecellcarcinomaandadenocarcinoma(P<0.01),theexpressionofMCM2wereassociatedwithdifferentiationgradeofNSCLC,thepoorerdifferentiation,thelowerexpression(P<0.01),theexpressionofMCM2weren'tassociatedwithpathologicstage(P>0.05).Conclusion:Asaspecificcellproliferationmarker,theexpressionofMCM2issignificantlyassociatedwiththeclinicalfeaturesofNSCLC.

Keywords:minichromosomemaintenanceprotein2,non-smallcelllungcancer,immunohistochemistry

恶性肿瘤的一个显著特征是细胞具有自主生长特性,即持续地分裂与繁殖.近年来对细胞生长调控机制的研究,DNA复制起始调控在细胞生长调控中的核心作用已被提出.一个新的细胞增殖指标MCM蛋白家族(包括MCM2~7),越来越受到人们的关注.它们是细胞周期中启动DNA复制的关键因子,已被证明与许多肿瘤的预后密切相关.微小染色体支持蛋白2(minichromosomemaintenanceprotein2,MCM2)是6种微小染色体支持蛋白家族之一,它在哺乳动物的细胞复制中有许可证(licencingfactor)作用,它是细胞DNA复制的必要成分,并限制每个细胞周期中DNA只能复制一次,MCM2与细胞复制叉(replicationforks)有关,其功能在复制过程中起DNA解螺旋作用,从而使DNA复制进行[1].

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本研究拟利用免疫组化的方法研究MCM2在肺癌尤其是非小细胞肺癌中的表达,研究其表达与肿瘤细胞分化程度,临床分期,组织学类型的关系,研究MCM2这一细胞增殖的特异性标记物与肺癌的肿瘤细胞增殖分裂过程的相关性,探讨抗MCM2抗体的使用是否对肺癌的早期诊断有价值,能否改善肺癌患者的预后,同时为将来有针对性的抑制MCM2以求杀灭肿瘤细胞这一新的治疗方向提供依据.

1材料和方法

1.1一般资料

标本均来自2003年3月到2005年10月间山东省烟台毓璜顶医院施行肺癌切除术的病例.72例均为非小细胞肺癌(NSCLC),其中男41例,女31例;年龄平均65.3岁;组织学分型,腺癌46例,鳞癌23例,大细胞癌3例;病理分级,Ⅰ级2例,Ⅱ级29例,Ⅲ级41例;临床分期,Ⅰ期39例,Ⅱ期18例,Ⅲ期15例.全部病例均获病理确诊,且术前未行化疗或放疗.另取8例正常肺组织作为对照组.

1.2主要试剂

抗MCM2p抗体,为鼠抗人单克隆抗体原液(200μg/ml),Neomarkers公司产品.即用型第二代免疫组化广谱试剂盒,均为福州迈新生物技术公司产品.

1.3MCM2的检测

均采用MaxVision快捷免疫组化染色法行免疫组织化学染色.经预实验确定1∶200为MCM2p一抗最佳稀释度,DAB显色,苏木素复染,中性树胶封片,用PBS替代一抗作阴性对照.

1.4结果判定

MCM2表达的阳性判断标准为细胞核染成棕黄色或棕褐色,而胞浆染成棕黄色可视为阳性.同时按以下方法计算MCM2的标记指数(labellingindex,LI):低倍镜下选择5个阳性细胞最密集、背景最清晰区域,每个区域在高倍镜下计算100个细胞中阳性细胞数,取5个区域阳性细胞数的平均值作为其标记指数.

1.5统计学处理

用Kruskal-Wallis秩和检验MCM2表达情况与临床病理特征之间的关系,用Wilcoxon符号秩检验进行成对分组下的两种处理方法的比较,用Spearman秩相关分析法进行临床分期和病理分化程度的统计学处理;全部数据统计均在计算机上使用SPSS13.0进行.

2结果

72例非小细胞肺癌均见MCM2表达,MCM2表达强弱与非小细胞肺癌的组织学分型相关,鳞癌MCM2表达标记指数中位数与腺癌及大细胞癌相比有显著差异(P<0.01);MCM2表达强弱与非小细胞肺癌的分化程度密切相关,分化越低,表达越明显(P<0.01);MCM2表达强弱与非小细胞肺癌的临床分期无关(P>0.05).8例正常肺组织未见MCM2表达.MCM2在非小细胞肺癌中的表达见图1.


MCM2在非小细胞肺癌中的表达与临床病理特征的关系见表1.

3讨论

肺癌是最常见和最难治的恶性肿瘤之一,其发病率逐年升高,病死率很高,5年生存率仅为13%,其中50%~60%的患者不能手术.肺癌依其生物学特性分为二类,一是非小细胞肺癌(NSCLC),占75%,另一类是小细胞肺癌,占25%.绝大部分NSCLC患者对放疗和化疗不敏感,成为临床治疗中的一大难题.因此人们积极寻找肺癌早期诊断的方法及手术、放疗、化疗以外的治疗肿瘤的新疗法,是目前肺癌及其他肿瘤研究的热点.


如何撰写细胞硕士论文
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目前使用的增殖标记物如增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)和ki-67,PCNA既可在细胞复制中表达,也可在细胞修复中表达,因此不具有细胞增殖的特异性,而ki-67在细胞增殖周期的G1期不表达,其对增殖细胞的阳性检测率大大降低.

目前研究已经证实,MCM2是细胞周期阶段的特异性标志物,在进入细胞周期的细胞中均有表达,但在分化成熟的细胞及静止期(G0期)细胞中则不表达,因此,在增殖发育异常和突变的细胞中,MCM2可作为细胞增殖标记物来标记细胞所处的状态.鉴于MCM蛋白的下调引起人细胞增殖能力的丢失,因而,MCM蛋白作为检出“伴有生长潜能”的G1期细胞的一个新的生物学标记已被提出[1].此外,抗MCM抗体并不检测那些正经历DNA修复的细胞,从而特异地标记细胞增殖.MCM蛋白表达的这一特性使其在病理学的诊断和鉴别诊断中具有重要的意义并已应用于临床.

Semple等[2]认

1 2

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