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关于体育科学相关论文范本,与流式细胞术在体育科研中的应用相关毕业论文
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339;10］.许多研究表明低氧训练时的Hb的变化与RET有很高的相关性［11］.刘媛媛等研究了13名国家女子中长跑队运动员RET在26d的低氧训练的变化发现,HiHiLo组的IRF、RMI以及Hb、RET%的增加幅度均高于LoHi组同时段各指标；并且受检网织红细胞参数反映骨髓红系增生的敏感性依次为IRF等于RMI>RPI等于RET%和RET%>Hb［12］.张春丽等还发现模拟HiLo的大鼠高强度定量负荷组与极限负荷组的RET%显著低于常氧组.两氧环境中,高强度定量负荷组RET%显著低于运动后40h安静组［13］.但AshendenMJ等对澳大利亚国家女自行车运动员为期70d的高住(海拔高度2650m)低练的研究结果表明,对RET和Hb没有显著意义［14］.Lundby等对8名运动员模拟高原(4100m)的低氧舱中为期14d的间歇性低氧训练后,RET还包括EPO、Hb和HCT无明显改变［15］.产生这种不同的研究结果,除有运动项目自身的因素外,研究时还要考虑网织红细胞变化先于Hb的特点.因为有人动态观察显示HFP(早期网织红细胞)比率的升高可早于Hb变化3～5d,早于MCV变化5～7d［16］.
2.4运动与血小板相关免疫球蛋白和血小板微粒膜蛋白分析血小板功能变化是血栓形成的病理过程的重要因素.FCM已经成为检测血小板功能状态的重要实验手段,因为它有助于区分血小板病理学形态变化和膜蛋白分析；可以研究不同诱导剂作用下、剪切力诱导下血小板活化时其钙离子浓度的变化,检测活化血小板,血小板缺陷性、减少性疾病；检测网织血小板（RP）可用于发生栓塞的危险性判断.
运动作为一种预防高血压患者血栓性疾病发生的手段,已为人们所接受并在实践中广泛应用,窦丽等研究发现进行10周中等强度的游泳运动能提高高血压大鼠血小板内NOS活性,增加血小板NO的释放,提高血小板内cGMP水平来抑制血小板的聚集,对防治高血压血栓性疾病有重要的作用［17］.研究还有长期规则游泳运动对Wistar大鼠血小板L-Arg转运的影响,结果表明,适宜运动可提高血小板L-Arg（L-精氨酸）转运率,据此推测运动可通过增加L-Arg的转运,促进血小板NO的合成和释放,以负反馈方式抑制血小板的聚集,从而对预防血管栓塞性疾病有积极的作用［18］.研究表明早期康复训练可下调急性脑梗死（ACI）早期血小板活化及血小板胞浆内-α粒膜上糖蛋白CD62P的表达［19］.
2.5用于细胞凋亡的检测细胞凋亡是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序性的死亡.近年来研究多用FCM来检测细胞凋亡,包括凋亡DNA的检测、细胞质膜的完整性、线粒体跨膜电位、溶酶体质子泵、蛋白质和DNA含量、光的散射、DNA的原位降解、细胞凋亡的定量测定等.FCM常用于凋亡检测的方法有Caspase-3、AnnexinV和DNA断裂片段的分析等方法,其中AnnexinV联合PI法是一种新的较为理想的检测方法.
FCM在运动与淋巴细胞凋亡研究中的应用.大多数研究发现小负荷运动不影响淋巴细胞的凋亡［20］；有趣的是有研究发现,中等负荷运动训练可以降低心理应激导致的大鼠外周血淋巴细胞凋亡量,降低心理应激对大鼠机体免疫功能的危害［21］.大负荷运动会导致运动后血液中淋巴细胞的凋亡,王安利较全面地研究了不同负荷对小鼠淋巴细胞凋亡的影响,发现6月龄小鼠、12月龄小鼠淋巴细胞凋亡的发生率由高到低,其排列顺序依次是,负重运动组>一次性力竭运动组>对照组>无负重组［22］.
FCM在运动与骨骼肌细胞凋亡研究中的应用.Biral等研究发现成年小鼠经过12h的钢笼内自发跑后,运动后即刻肌细胞凋亡率最高,6h后稍微有所下降,96h后凋亡率大幅度下降［23］.越来越多的证据表明,运动训练导致的肌肉细胞凋亡有一定的时相性和矛盾性,运动可以导致骨骼肌细胞凋亡,但是运动本身对已经凋亡骨骼肌细胞可能具有清除作用或对即将凋亡的骨骼肌细胞有恢复作用,这两种作用结果之间调控失衡,可能是造成骨骼肌运动损伤原因之一,说明运动影响骨骼肌细胞的凋亡具有双向性［24］.
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许多研究采用FCM检测大鼠各组心肌、肾组织细胞和肝细胞凋亡率的变化发现运动可以诱导肝细胞凋亡、心肌细胞凋亡,且随运动强度增加而增加［25］.金其贯等研究还发现力竭后即刻心肌细胞凋亡与肾细胞凋亡率即明显升高,之后的24h之内,它们会有一个明显升高然后降低的过程但仍明显高于对照组［26］.还有研究发现补充银杏制剂、胆红素可通过其抗氧化作用及影响凋亡相关基因的表达而抑制大强度运动训练诱导的肝、心肌细胞过度凋亡,从而发挥一定的保护作用［27］.
总之,FCM不仅为细胞是否发生凋亡提供客观证据,而且还能对细胞凋亡进行定量分析,并可从多方面证实细胞凋亡和细胞坏死的区别,同时还能检测同一群体的不同亚群细胞中的凋亡细胞,并可进行分选.
2.6用于检测与运动能力相关基因的表达产物FCM在此方面的研究国内未见报道,它的优势在于不必分离蛋白质就可以对细胞膜表面、细胞浆中的蛋白质进行分析检测.如近几年的研究热点淋巴细胞的细胞因子（γ-INF、α-TNF）的分泌［28］.StaatsR等为了解剧烈运动后运动员体内NK细胞毒活性(NKCA)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)抑制的原因,研究了淋巴细胞亚群改变和细胞内穿孔素（PFR）基因表达改变的相关性,使用流式细胞仪对PFR进行了分析.他们发现:训练有素的运动员外周血中PFR的百分比相对较高,但在过度疲劳后PFR出现暂时性下降［29］.
3FCM在体育科研应用中存在的问题
综上所述,FCM以其快速、准确、灵活、多参数同时分析等优点,已成为体育科研的重要方法之一.但其中也存在以下问题：1）联用抗体对运动影响人体免疫细胞功能的组合设计处于初级阶段.FCM对临床白血病和淋巴瘤等疾病的诊断已有多种成熟的抗体“组合”方式；但关于运动对人体免疫细胞影响的研究还多停留在T细胞亚群水平,并没有形成比较成熟的抗体组合（没有系统的CD研究方案）.2）通常检测的是外周血标本,更应考虑留取其他标本（如骨髓、淋巴节、胸腔液、腹腔液或脑脊液）.因为这样才有可能及时、准确、全面地反映机体功能的变化,但这些样本不易从健康个体获取.3）应加强研究不同训练负荷量和不同补剂对血小板功能、粒细胞功能的影响,为运动疾病的防治提供理论依据.4）加强质量控制,一些FCM检测技术在方法学和抗体选择上还没有统一,分析结果亦存在多种影响因素,如样本与试剂准备、免疫荧光染色方法、对照设置、流式细胞数据的获取与分析等.只有充分了解这些影响因素,建立标准化的操作程序并做好严格的质控,才能保证检测结果准确、可靠.相信,随着FCM的不断发展完善,它将为体育的基础与应用研究开创新局面.
参考文献：
［1］EliakimA,WolachB,KodeshE.etal.CellularandHumoralImmuneResponsetoExerciseAmongGymnastsandUntrained
Girls［J］.IntJ
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